细菌/真菌MLST分型服务
来源:忠科检测
忠科检测提供的细菌/真菌MLST分型服务,MLST(Multi-LocusSequenceTyping,多态性序列分型)是一种基于细菌或真菌多个管家基因序列差异来进行菌株分型的方法,出具具有CMA,CNAS资质报告。

MLST(Multi-Locus Sequence Typing,多态性序列分型)是一种基于细菌或真菌多个管家基因序列差异来进行菌株分型的方法。该技术通过PCR扩增和测序一系列标准化的管家基因(即在所有菌株中都存在且功能较为保守的基因),然后根据这些基因片段的序列差异来定义不同的等位基因,并进一步组合成不同的序列类型(Sequence Type,ST)。每个菌株都有其特定的ST,因此可以用来对细菌或真菌进行分类、追踪传播路径以及研究进化关系等。
细菌/真菌MLST分型服务就是指利用MLST技术,为客户提供针对特定细菌或真菌样本的精确分型服务,帮助客户了解样品中的微生物种群结构、遗传多样性和进化关系等信息,在流行病学调查、感染病原体溯源、食品安全检测等领域具有广泛应用价值。
检测目的
MLST,即多态性序列分型(Multilocus Sequence Typing),是一种基于细菌或真菌多个管家基因的核酸序列差异来进行菌株分型的方法。其主要目的包括:
1. 病原菌种群遗传变异的研究:通过比较不同菌株同一组管家基因的序列差异,可以揭示细菌/真菌种群内部的遗传多样性,了解其进化关系和传播模式。
2. 菌株溯源与流行病学调查:在疾病暴发或感染事件中,MLST可用于追踪和区分不同来源的菌株,帮助公共卫生部门进行传染源追溯、传播途径分析以及疫情预警。
3. 抗药性监测与研究:某些特定MLST类型可能与抗药性表型相关,通过对菌株的MLST分型有助于预测和监控耐药性的产生和发展趋势。
4. 疾病诊断与治疗指导:为临床提供更精确的病原微生物鉴定信息,辅助医生制定个性化的治疗方案。
5. 疫苗研发与防控策略制定:深入理解菌株间的遗传差异对于疫苗设计和防控策略优化具有重要意义。
检测项目
MLST(Multi-Locus Sequence Typing,多位点序列分型)是一种基于细菌或真菌多个管家基因(housekeeping genes)的核酸序列差异来进行菌株分型的方法。该技术通过PCR扩增和测序特定的、高度保守的管家基因片段,然后比较这些基因序列的多态性,以达到对细菌或真菌种群进行亚型分类的目的。
在细菌/真菌MLST分型服务项目中,通常包含以下步骤:
1. 样本收集与DNA提取:首先从样本中提取高质量的细菌或真菌基因组DNA。
2. PCR扩增:针对预先设定的多位点序列,设计并合成特异性的引物进行PCR扩增。
3. 序列测定:对PCR产物进行测序,获取多位点基因片段的详细序列信息。
4. 数据分析:将测序得到的序列与已知数据库中的序列进行比对分析,确定每个位点的等位基因型,并据此推导出样品的序列类型(Sequence Type, ST)。
5. 聚类分析:根据ST数据构建系统发育树或者进行eBURST分析,展示不同菌株之间的遗传关系,有助于流行病学追踪、溯源以及群体遗传学研究。
这项服务广泛应用于临床诊断、食品安全、环境微生物监测、疾病暴发调查等领域,为细菌和真菌的分子流行病学、物种进化及抗药性机制等方面的研究提供了有力的技术支持。
检测流程
细菌/真菌MLST分型服务流程通常包括以下几个步骤:
1. 样品收集与运输:
客户从样本源(如环境样本、临床样本等)中采集细菌或真菌,并按照服务商提供的标准操作程序进行处理、保存和运输。确保样本在运输过程中不被污染,且生物活性得以保持。
2. 核酸提取:
在收到客户样本后,服务商首先进行核酸(DNA)的提取,这是后续分子分型的基础。使用自动化或者手动核酸提取试剂盒对样本中的细菌或真菌DNA进行纯化和浓缩。
3. PCR扩增:
根据MLST(Multi-Locus Sequence Typing,多位点序列分型)方案,设计并合成针对7个管家基因(housekeeping genes)的特异性引物,通过PCR技术对这些基因片段进行扩增。
4. 测序分析:
对PCR产物进行Sanger测序或者高通量测序,得到每个管家基因的序列数据。
5. 序列比对与分型:
将获得的序列与数据库(如pubmlst.org等)中的已知序列进行比对,确定每个管家基因的等位基因类型,进而根据各个等位基因组合推断出菌株的序列型(Sequence Type, ST)。
6. 报告出具与解读:
结合实验结果,服务商将出具详细的MLST分型报告,包含菌株的ST信息、所属克隆群等相关结论,并对结果进行专业解读,以帮助客户理解菌株的遗传背景、进化关系以及可能的致病性或耐药性特征。
7. 客户服务与技术支持:
服务商还提供后期的技术咨询和解答,以满足客户在研究或应用过程中的需求。
以上是大致的服务流程,具体细节可能会因不同的服务商和实验条件而有所差异。