16S/ITS分型测序服务

忠科检测提供的16S/ITS分型测序服务,16S/ITS分型测序服务是一种基于分子生物学技术,主要用于微生物(细菌、真菌等)分类与鉴定的科研服务,出具具有CMA,CNAS资质报告。
16S/ITS分型测序服务
我们的服务 16S/ITS分型测序服务
16S/ITS分型测序服务是一种基于分子生物学技术,主要用于微生物(细菌、真菌等)分类与鉴定的科研服务。这里的"16S"和"ITS"分别代表了两种不同的分子标记物:
1. 16S rRNA基因测序:在细菌和古菌中,16S rRNA基因具有高度保守性和种内变异性的特点,通过对其部分或全长序列进行PCR扩增和高通量测序,可以实现对环境样本、临床样本等复杂微生物群落的物种鉴定和相对丰度分析。
2. ITS (Internal Transcribed Spacer) 测序:在真菌中,ITS区域位于两个高度保守的rRNA基因(18S、5.8S和28S)之间,包括ITS1和ITS2两个间隔区。由于ITS序列在不同真菌物种间具有较高的变异性,因此常被用来进行真菌种属水平的鉴定和系统发育分析。
所以,16S/ITS分型测序服务就是利用这两种分子标记物来探究样品中的微生物多样性、组成结构以及物种差异的研究手段。

检测目的


16S rRNA基因测序和ITS(Internal Transcribed Spacer)测序是两种常用的微生物分类和鉴定技术,它们的主要目的是:
1. 微生物群落结构分析:通过对环境样本(如土壤、水体、人体肠道等)中细菌(16S rRNA测序)或真菌(ITS测序)的相应基因片段进行高通量测序,可以揭示样本中微生物种群的多样性、丰度以及相对比例,帮助科研人员了解微生物群落结构。
2. 微生物分类与鉴定:16S rRNA基因和ITS区域在不同物种间具有高度保守性和种内变异性的特点,通过比对测序结果与已知数据库中的序列,可以对微生物进行到属、种水平的分类和鉴定。
3. 相关功能研究:通过对特定环境下微生物群落结构的研究,可探索微生物与环境、宿主之间的相互作用关系,例如在生态学、医学、农业等领域,有助于理解微生物在生态系统功能维持、疾病发生发展、农业生产等方面的作用。
4. 病原菌检测与追踪:在临床诊断和食品安全领域,16S/ITS分型测序也可用于快速准确地识别病原微生物,甚至是追踪其来源。

检测项目


16S rRNA基因测序和ITS(Internal Transcribed Spacer)测序是两种常见的微生物分类与鉴定的分子生物学技术,它们在微生物多样性研究、环境微生物学、临床微生物学等领域有广泛应用。
1. 16S rRNA基因测序:这是用于细菌和古菌分类鉴定的标准手段。16S rRNA基因在所有细菌中高度保守,但在物种之间存在足够差异,通过测序并比对这部分基因序列,可以精确地确定样本中包含的微生物种类及其相对丰度,进而分析微生物群落结构和功能。
2. ITS测序:主要用于真菌的分类和鉴定。ITS区域位于真菌核糖体RNA基因(rDNA)的18S、5.8S和28S rRNA基因之间的两个内转录间隔区(ITS1和ITS2),这些区域在不同真菌物种间具有较高的变异性,因此可用于区分不同的真菌物种。
16S/ITS分型测序服务项目通常包括样品采集、DNA提取、PCR扩增、高通量测序、生物信息学分析等步骤,最终为客户提供详细的微生物群落组成报告及深入的生物多样性分析结果。

检测流程


16S/ITS分型测序服务流程一般包括以下几个步骤:
1. 样品收集与预处理:
根据研究目标,从环境、人体微生物组、土壤、水体等各种来源收集样本。
对样本进行相应的物理和化学处理,如研磨、裂解、DNA提取等,以获取高质量的微生物基因组DNA。
2. PCR扩增与文库构建:
使用特异性引物对16S rRNA基因(针对细菌和古菌)或ITS区域(针对真菌)进行PCR扩增。这两个区域是微生物分类鉴定的经典分子标记。
扩增产物经过纯化后,通过接头连接等方式构建高通量测序文库。
3. 测序平台选择与测序:
选择适合的二代测序平台(如Illumina MiSeq、NovaSeq等)或三代测序平台进行测序,通常采用PE双端测序以提高数据质量。
4. 原始数据分析:
下机数据初步质控,去除低质量序列、接头和引物序列。
使用特定软件(如Qiime, Mothur, UPARSE, DADA2等)进行序列拼接、去重、 chimera检测以及OTU(Operational Taxonomic Units)聚类。
5. 生物信息学分析:
将OTUs比对到 SILVA、Greengenes 或 UNITE 等数据库进行物种注释,获得各个样本的物种组成及其相对丰度。
进行α多样性(反映单个样本内部的物种丰富度和均匀度)、β多样性(比较不同样本之间的物种组成差异)分析。
如果有必要,还可以进行相关性分析、网络构建、功能预测等进一步分析。
6. 结果解读与报告撰写:
根据分析结果,结合客户的研究背景和问题,提供详细的报告解读。
报告中通常会包含样品间微生物群落结构比较、优势菌属识别、潜在功能解析等内容。
以上就是16S/ITS分型测序服务的一般流程,具体操作可能会因服务商的不同而有所差异。
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